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O que é CD4?

CD4 (Grupamento de diferenciação 4 ou cluster of differentation, em inglês) é uma molécula que se expressa na superfície de algumas células T, macrófagos, monócitos, célula dendrítica e nos neutrófilos. É uma glicoproteína monomérica de 59kDa que contém quatro domínios (D1, D2, D3, D4) de tipo imunoglobulinas.

Papel no HIV

O HIV penetra nos macrófagos e nos linfócitos T CD4+ através da adsorção de glicoproteínas na sua superfície para recetores na célula-alvo, seguida pela fusão do envelope viral com a membrana celular e pela libertação do capsídeo do VIH na célula.

A penetração na célula tem início com a interação do complexo envelope trímero (gp160) com o CD4 e um recetor de quimiocina na superfície da célula (geralmente o CCR5 ou CXCR4, embora sejam conhecidos outros). A gp120 liga-se à integrina α4β7, ativando o LFA-1, a principal integrina envolvida no estabelecimento de sinapses virológicas, que facilita a disseminação eficiente do VIH-1 entre células. A gp160 contém domínios de ligação tanto para o CD4 como para os recetores de quimioquina.

O primeiro estágio na fusão envolve a união dos domínios de ligação CD4 da gp120 ao CD4. Uma vez ligada a gp120 com a proteína CD4, o complexo envelope atravessa uma alteração na estrutura, expondo os domínios de ligação de quimioquina da gp120 e permitindo-lhes interagir com o recetor-alvo de quimioquina. Isto permite uma ligação mais estável, o que permite ao peptídeo de fusão N-terminal gp41 penetrar na membrana celular. Em seguida, as sequências de repetição na gp41, HR1 e HR2 interagem entre si, provocando o colapso da porção extracelular da gp41 num hairpin. Esta estrutura circular aproxima o vírus da membrana celular, permitindo a fusão das suas membranas e consequente entrada do capsídeo viral.

Depois do VIH se ligar à célula-alvo, injeta nela o seu RNA e as suas diversas enzimas, incluindo a transcriptase reversa, integrase, ribonuclease e protease. O VIH pode infetar células dendríticas (CD) através do processo CD4-CCR5, embora possa também usar recetores de lectina tipo C. As células dendríticas são uma das primeiras células que o vírus encontra durante a trensmissão por via sexual. Atualmente, pensa-se que as CD desempenhem um papel importante na transmissão do VIH para os linfócitos, durante o momento em que o vírus é capturado na mucosa. Acredita-se que a presença da proteína FEZ-1, que ocorre naturalmente em neurónios, impeça que o VIH infecte as células.

O que é CD8?

CD8 ( cluster de diferenciação 8) é uma glicoproteína transmembrana que serve como co-receptor para o receptor de células T (TCR). Junto com o TCR, o co-receptor CD8 desempenha um papel na sinalização de células T e auxilia nas interações de antígenos de células T citotóxicas .

Como o TCR, o CD8 se liga a uma molécula do complexo principal de histocompatibilidade (MHC), mas é específico para a proteína MHC de classe I.

Existem duas isoformas da proteína, alfa e beta, cada uma codificada por um gene diferente. Em humanos, ambos os genes estão localizados no cromossomo 2 na posição 2p12.

A distribuição nos tecidos

O co-receptor CD8 é predominantemente expresso na superfície de células T citotóxicas , mas também pode ser encontrado em células assassinas naturais , timócitos corticais e células dendríticas . A molécula CD8 é um marcador para a população de células T citotóxicas. É expressa no linfoma linfoblástico de células T e na micose fungóide hipo-pigmentada.

Estrutura

Para funcionar, o CD8 forma um dímero, que consiste em um par de cadeias de CD8. A forma mais comum de CD8 é composta por uma cadeia CD8-α e CD8-β, ambos membros da superfamília das imunoglobulinas com um domínio extracelular semelhante a imunoglobulina variável (IgV) conectado à membrana por um pedúnculo fino e uma cauda intracelular. Homodímeros menos comuns da cadeia CD8-α também são expressos em algumas células. O peso molecular de cada cadeia CD8 é de cerca de 34 kDa. [3] A estrutura da molécula CD8 foi determinada por Leahy, DJ, Axel, R., e Hendrickson, WA por difração de raios-X em uma resolução 2.6A. Determinou-se que a estrutura tinha um dobramento em sanduíche beta do tipo imunoglobulina e 114 resíduos de aminoácidos. 2% da proteína é enrolada em hélices α e 46% em folhas β, com os restantes 52% das moléculas permanecendo nas porções de alça.

Representação esquemática do co-receptor CD8 heterodimérico

Função

O tipo IgV do domínio extracelular de CD8 interactua-alfa com o α 3 porção da molécula de MHC de Classe I. Essa afinidade mantém o receptor de célula T da célula T citotóxica e a célula-alvo intimamente ligadas durante a ativação específica do antígeno. As células T citotóxicas com a proteína de superfície CD8 são chamadas de células T CD8 +. O principal local de reconhecimento é uma alça flexível no domínio α 3 de uma molécula de MHC. Isso foi descoberto fazendo análises mutacionais. O domínio α 3 flexível está localizado entre os resíduos 223 e 229 no genoma. Além de auxiliar nas interações de antígenos de células T citotóxicas, o co-receptor CD8 também desempenha um papel na sinalização de células T. As caudas citoplasmáticas do co-receptor CD8 interagem com Lck (proteína tirosina quinase específica de linfócitos). Uma vez que o receptor de células T se liga ao seu antígeno específico, Lck fosforila o CD3 citoplasmático e as cadeias ζ do complexo TCR, que inicia uma cascata de fosforilação, eventualmente levando à ativação de fatores de transcrição como NFAT, NF-κB e AP-1 que afetam a expressão de certos genes.

O que é CH50?

A determinação de proteínas do complemento ou da sua atividade é utilizada para indicar se o sistema do complemento foi ativado por um mecanismo imunológico e/ou patogénico. A medição do CH50 é utilizada para avaliar pacientes quando se suspeita de uma doença ativadora do complemento ou para a pesquisa de uma deficiência hereditária. As proteínas do complemento aumentam em resposta a processos inflamatórios ou infecciosos (resposta inflamatória de fase aguda.) e diminuem ou estão ausentes no hipercatabolismo, deficiência hereditária ou consumo por formação de imunocomplexos (glomerulonefrites, lupus eritematoso sistêmico, artrite reumatóide).

MATERIAL

SORO CONGELADO

MÉTODO(S) E VALOR(ES) DE REFERÊNCIA

Método

Parâmetro

Valor de referência

ENZIMAIMUNOENSAIO

COMPLEMENTO TOTAL – CH50

Normal: 60,0 a 145,0 U CAE

Baixo.: Inferior a 60,0 U CAE

Alto..: Superior a 145,0 U CAE

U CAE.: Atividade do Complemento

PRODUÇÃO DO EXAME

Volume Mínimo

2 mL

Prazo

4 dias úteis

Realização

Segunda, quarta e sexta-feira

Meio(s) de coleta

Tubo seco (vermelho)

INSTRUÇÕES DE PREPARO

Jejum: Jejum aconselhável de 4 horas. (CH50)

INSTRUÇÕES DE COLETA

Após coleta (não utilizar gel separador), a amostra deve ser deixada por uma hora em temperatura ambiente antes de ser centrifugada. Separar o soro, congelar e encaminhar ao laboratório. Evitar ciclos de congelamento e descongelamento da amostra. (CH50)

INSTRUÇÕES DE DISTRIBUIÇÃO

Transportar congelado (-20°C) (CH50)

INSTRUÇÕES DE REJEIÇÃO

Amostras com tubo inadequado, tubo vazado ou não identificado, fora do prazo de estabilidade. (CH50) Amostras descongeladas. (CH50)

INSTRUÇÕES ADICIONAIS

Data de revisão: 06/10/2017. (CH50)

OUTROS NOMES

ATIVIDADE TOTAL DO COMPLEMENTO VIA CLÁSSICA, CBHPM – 40306747, CH100 – COMPLEMENTO TOTAL

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